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氰基柱、氨基柱的使用和清洗和保存

發(fā)布時間: 2022-03-21  點擊次數(shù): 8825次

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氰基柱、氨基柱的使用和清洗和保存

1、氨基柱的使用

氨基柱的鍵合官能團氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準備,特別是當使用條件是反相條件下時。

反相條件使用時,要特別注意控制PH值范圍,PH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。

所以,在使用后以及準備長時間放置時,必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是必需的。

當使用氨基柱進行酸性物質(zhì)如果汁中糖份的分析時,酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,使用一段時間后對于某類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)為柱效下降。

這時,建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。

2、氨基柱的清洗

簡單說起來,正相條件下使用的氨基柱參照硅膠柱的清洗方法;反相條件下使用的氨基柱參照C18的清洗方法。

(1)平時在正相條件下使用:

首先用50倍柱體積的異丙醇清洗,因異丙醇粘度較大需適當放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之后,用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動相,即可。

(2)平時在反相條件下使用:
緩沖鹽應(yīng)及時沖洗,不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等,屬常識就不作特別交待。

用50倍純甲醇沖洗;之后,用異丙醇過渡后,用二氯甲烷沖洗色譜柱;之后,再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。

這些清洗方法,主要是針對當樣品中有雜質(zhì)逐步吸附累積到填料上時的處理方法,色譜柱表現(xiàn)行為為諸如柱壓增高柱效降低等。

3、氨基柱的保存

正相使用時,將柱子沖洗干凈后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

反相使用時,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;長期不用時需將甲醇依次用異丙醇、氯仿置換,最后用正己烷保存。




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